中医药方向的小伙伴在做课题研究的时候还在盯着网络药理学吗?快来看看小鼠实验吧,实验简单还易发高分。今天小薇就以一篇文献为例,为大家总结一下药物-肥胖相关研究的6分+思路(今年的新文献还是热乎的)。
我们先来看看作者做的graphical abstract吧:
怎么样,是不是光看这个graphical abstract就大概能看得出研究思路了?一张好的graphical abstract是不是很重要呢?(悄悄告诉你,小薇也会做哦!)还不是很清楚的小伙伴我们就来看看具体的实验吧(文末有小薇做的简易版流程图哦!):
主要方法
01 制备提取物(本研究中就是台湾绿蜂胶TGP)
02 实验动物准备(不会做分组的小伙伴要重点看看这部分哦)(小鼠被随机分为八组(每组16只)。C组使用标准的LabDiet 5001饲料;C500组使用饲料和500ppm eTGP;C1000组使用饲料和1000ppm eTGP(注意不同剂量组的设计);CM组使用饲料加0. 1%的二甲双胍,H组采用TestDiet 58Y1高脂饮食(HFD);H500组采用HFD和500ppm eTGP;H1000组采用HFD和1000ppm eTGP;HM组采用HFD和0.1%二甲双胍(注意阳性对照的设置哦)
03 记录事宜和检测指标:每周两次记录食物、水的摄入量和体重。治疗12周后,每组的16只小鼠接受以下三个测试组中的一个:1) 采集微生物群测量短链脂肪酸水平和16s rRNA基因测序,采集白色脂肪组织(WAT)进行RNA测序,生化分析和组织学检查(n = 6);2)腹腔内葡萄糖耐量试验(IPGTT)、胰岛素耐量试验(ITT)和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)(n = 6);以及3)测量能量消耗(EE)和呼吸交换率(RER)以及耐寒试验(n = 4)。
04 使用磁共振成像系统(MRI)测定小鼠的脂肪和瘦肉百分比
05 血清生物化学分析:空腹血糖(FBG)、血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血胰岛素(FBI)、血清糖化血红蛋白(HbA1c)。IL-6、TNF-α、脂肪因子、胰岛素抵抗的平衡模型评估(HOMA-IR)计算:HOMA-IR=空腹血糖(mg/dL)×空腹胰岛素(μU/mL)/405。
06 组织学检查:测量脂肪细胞的大小
07 新陈代谢活动的测量:小鼠的能量消耗(EE)、呼吸交换率(RER)测量
08 耐寒性试验
09 腹腔内葡萄糖耐量试验(IPGTT)、口服葡萄糖耐量试验(OGTT)和胰岛素耐量试验(ITT)
10 16S rRNA基因测序:α-多样性指标、β-多样性分析、主成分分析(PCA)、PCoA
11 短链脂肪酸(SCFAs)测定
12 转录组分析:确定差异表达基因
13 Micro-Western array (MWA):测量组织中的蛋白质表达
以上就是本研究做的主要实验,我们通过一张流程图来汇总一下本研究的思路吧:
总结一下研究思路就是:1. 构建动物模型 2. 分组处理 3. 生理相关指标检测 4. 生物信息学分析以及实验验证。
简单易上手的实验思路,你学会了吗?还有任何实验设计之类的问题都可以联系小薇。