■ H9C2细胞由KIMES B和BRANDT B从BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆得到;表现出许多骨骼肌的特性。
■ 这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。
■ 如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合很快发生。
本文为大家介绍H9C2的培养条件及注意事项
一、培养条件
■ 生长特性:贴壁
■ 形态特征:成纤维细胞样
■ 培养条件:DMEM(改良型) +10%胎牛血清(进口南美级别)
■ 传代比例:1:3传代(培养面积比)
■ 传代方式:消化1分30秒
■ 换液频率:2~3天换液1次
■ 冻存液配方:DMEM(改良型)+10%FBS+10%DMSO
■ 培养要点:建议使用改良型DMEM培养基培养
二、常见问题
01
为什么会出现空泡?
可能是铺板时铺得不够均匀,局部过于密集,密集地方的细胞状态会变差、空泡增多。也可能是血清品质较差,要更换优质血清,及时换液
02
为什么细胞长得慢?
a
细胞密度低或细胞铺得不均匀,细胞长不起来,可以先培养,然后消化重新种瓶,提高密度培养或直接重新消化接种培养。
b
操作时力度没控制好,力度过大将细胞吹碎,状态变差。
c
血清品质较差,影响细胞生长,建议更换高品质血清。
03
H9C2细胞状态差,容易漂?
a
可能是血清问题,建议换高品质血清,并注意血清要程序解冻,不能水浴化开;
b
也有可能是细胞没铺匀,局部生长密集,需要及时传代,并不是细胞长满才传代,当有个别地方长得过于密集,容易叠加的时候应该就要传代了。
参考文献
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